如果您了解操作步骤,那么就能够制备优质培养基。今天我们一起来看制备优质培养基的八大步骤。
1.称量:根据用量按比例依次称取成分,牛肉膏常用玻棒挑取,放在小烧杯或表面皿中称量,用热水溶化后倒入烧杯,蛋白胨易吸湿,称量时要迅速。
2.溶解:在烧杯中加入少于所需要的水量,加热,ZHU一加入各成分,使其溶解,琼脂在溶液煮沸后加入,融化过程需不断搅拌。加热时应注意火力,勿使培养基烧焦或溢出。溶好后,补足所需水分。
3.调PH:用1mol/L NaOH或1mol/L HCl把PH调至所需范围。
4.过滤:趁热用滤纸或多层纱布过滤,以利于某些实验结果的观察,如无特殊要求时可省去此步骤。
5.分装:按实验要求,可将配制的培养基分装入试管内或三解瓶内;分装时注意,勿使培养基沾染在容器口上,以免沾染棉塞引起污染。
① 液体分装:分装高度以试管高度的1/4左右为宜,分装三角瓶的量则根据需要而定,一般以不超过三角瓶容积的1/2为宜。
② 固体分装:分装试管,其装量不超过管高的1/5,灭菌后制成斜面,斜面长度不超过管长的1/2。分装三解瓶,以不超过容积的1/2为宜。
③ 半固体分装:装置以试管高度的1/3为宜,灭菌后垂直待凝。
6.加棉塞:分装完毕后,在试管口或三解瓶口塞上棉塞或泡沫塑料塞及试管帽等,以阻止外界微生物进入培养基而造成污染,并保证有良好的通气性能。
7.包扎:棉塞头上包一层牛皮纸,扎紧,即可进行灭菌。
8.保存:灭菌后的培养基放入37℃养箱中培养24小时,以检验灭菌的效果,无污染方可使用。
制备目的:学习制备培养基的基本技术。
所需试剂:牛肉膏,蛋白胨、NaCl、琼脂、1mol/L NaOH、1mol/L HCl。
其它材料:试管,三角烧瓶,烧杯,量筒,漏斗,乳胶管,弹簧夹,纱布,棉花,牛皮纸,线绳,pH试纸,电炉,台称。
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