一、血清的保存问题。
1、问:2006年6月到期的GIBCO胎牛血清到2007年5月还能用吗?
答:只有试试了,如果一直在-20℃冻着来者,应该还可以,先少用点看看。养细胞系应该没问题,原代不行。
2、问:请问我自然溶化好的胎牛血清和1640培养基今天用不上,明天用,我不想放到冰箱里,放在室温下一晚行吗?100毫升培养瓶加多少培养基呢?
答:可以放4℃。4-5ml。
3、问:4℃冰箱内保存3个月的胎牛血清,能否继续使用?相关细胞和其它试剂的代价比较高,不敢轻易尝试。
答:需要长期保存的胎牛血清必须要保存在-20至-70℃的低温冰箱中,4℃冰箱中保存时间不要超过1个月。
二、血清灭活时温度问题。
1、问:因为实验室水浴锅失控,血清灭活时,温度到了61.7℃,这血清还能用吗?
答:多长时间啊?短时间应该可以吧,我有一次加热了一个多小时,还照样用。
2、问:我灭活胎牛血清时,用的电磁炉,定在了70℃,本来说调温度到56℃再放血清的,后来忘了,就把血清放进去了,所以灭活的温度肯定超过56℃了,不知道这样对血清有没有影响?
答:常规灭活建议的温度在45℃到62℃之间,而时间则从15分钟到60分钟不等,其中常用的手法是56℃热处理30分钟。看看你养的细胞是什么,一般的话估计问题不大,要是很珍贵的细胞还是慎重一点啊。热灭活目的是为了去除血清中补体等对热敏感的物质, 在对补体灭活以外,热处理同时也对血清中可能存在的支原体具有灭活作用。现在好像不主张热灭活,热灭活经常给血清产品带来负面影响,对血清的加热经常导致血清中沉淀的产生,此外,有研究结果证实热灭活步骤减弱了胎牛血清和小牛血清对细胞的促粘附作用。