大鼠Ⅱ型胶原（Col Ⅱ）试剂盒操作步骤

本试剂盒仅供研究使用。
检测范围：                                                                                                                    96T
0.5µg/L - 12µg/L
 
使用目的：
大鼠Ⅱ型胶原（Col Ⅱ）试剂盒用于测定大鼠血清、血浆及相关液体样本中Ⅱ型胶原（Col Ⅱ）含量。

大鼠Ⅱ型胶原（Col Ⅱ）试剂盒操作步骤
1.  标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀
释。
12µg/L  5 号标准品  150µl的原倍标准品加入150µl标准品稀释液
6µg/L  4 号标准品  150µl的5 号标准品加入150µl标准品稀释液
3µg/L  3 号标准品  150µl的4 号标准品加入150µl标准品稀释液
1.5µg/L  2 号标准品  150µl的3 号标准品加入150µl标准品稀释液
0.75µg/L  1 号标准品  150µl的2 号标准品加入150µl标准品稀释液 
 
 
2.  加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同） 、标准孔、
待测样品孔。 在酶标包被板上标准品准确加样50µl， 待测样品孔中先加样品稀释液40µl，然后再加待测样品10µl（样品zui终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽
量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
3.  温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。      
4.  配液：将30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水30 倍稀释后备用
5.  洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置 30 秒后弃去，如此
重复 5次，拍干。
6.  加酶：每孔加入酶标试剂50µl，空白孔除外。  
7.  温育：操作同3。
8.  洗涤：操作同5。
9.  显色：每孔先加入显色剂A50µl，再加入显色剂B50µl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色
15 分钟.
10.  终止：每孔加终止液 50µl，终止反应（此时蓝色立转黄色） 。
11.  测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD 值） 。 测定应在加终止
液后 15分钟以内进行。