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免疫荧光技术的使用方法
更新时间:2013-08-15      阅读:1741


免疫荧光技术的使用方法:

(1)直接荧光法  将荧光素标记在相应的抗体上,直接与相应抗原反应。其优点是方法简便、特异性高,非特异性荧光染色少;缺点是敏感性偏低,而且每检查一种抗原就需要制备一种荧光抗体。此法常用于细菌、病毒等病原微生物的快速鉴定。

(2)间接荧光法  用一抗与标本中抗原结合,再用荧光素标记的二抗染色。该法优点是敏感度比直接法高,制备一种荧光素标记的二抗即可用于多种抗原的检查,但非特异性反应亦增加。染色程序分为两步,首先用未知未标记的抗体(待检标本)加到已知抗原标本上,在湿盒中37℃保温30min,使抗原抗体充分结合,然后洗涤,除去未结合的抗体;然后加上荧光标记的抗球蛋白抗体或抗IgG、IgM抗体。如果*步发生了抗原-抗体反应,标记的抗球蛋白抗体就会和已结合抗原的抗体进一步结合,从而可鉴定未知抗体。  由于免疫荧光技术的特异性、快速性和在细胞和分子水平定位的敏感性与准确性,在动物检验检疫方面得到了广泛应用。
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