噬菌体在微生物界同样存在类似动植物界的食物链一样的关系，噬菌体滴度是如何测定的呢？再次与朋友见面就已经是2014年了，我公司的跨年*也已经圆满的结束了，而现在才是新年的开始，购我公司产品立送精美台历一个哦！下面来看看今天上海恒远为您特别分享：测定噬菌体滴度的方法。

    在宿主细胞过量的情况下，噬斑的数量随着噬菌体的增加呈线性增加。由于这个原因，在感染以前，要将噬菌体进行稀释，而不是将宿主细胞稀释。以低MOI(感染重复性)铺板，也可确保每一个噬斑仅包含一个DNA。 

材料和试剂：
1、微波炉；
2、LB/IPTG/Xgal培养 板；
3、lb培养基；
4、顶层琼脂糖凝胶。

操作步骤：
1、在5~10ml LB培养基中接种单个ER2537克隆，振摇孵育直至对数生长中期(OD600~0.5)。
2、在细胞生长时，微波融化顶层琼脂糖凝胶，分装至无菌培养管内，每管3ml。维持在45℃备用。
3、37℃预热LB/IPTG/Xgal培养板，备用。
4、以LB培养基10倍比稀释噬菌体。
建议稀释范围：对扩增的噬菌体培养上清，108-1011;对未扩增的筛选洗脱液，101-104。每次稀释都换用新的加样枪头，使用气溶胶阻隔枪头以避免交叉污染。
5、一旦ER2537培养物长至对数生长中期，分装至微量离心管中，每管200ml。
6、将倍比稀释的噬菌体上清加入含细菌培养物的微量离心管中，一支微量离心管中仅加入一种稀释液10ml，快速涡旋，室温孵育1-5min。
7、转移至含有45℃顶层琼脂糖凝胶的管中，快速涡旋混匀，立即倾倒至预热的LB/IPTG/Xgal平板上，轻缓摇动平板使顶层胶均匀分布。
8、冷却平板5min，37℃倒置培养过一个夜。
9、噬斑计数以噬斑数为100左右的平皿为准，噬斑数乘以稀释度即可获得每10ml噬菌体的滴度-噬斑形成单位(pfu)。

    朋友们，以上就是测定噬菌体滴度的方法啦，测定试验过后记得把结果与心得记录下来哦！这里是上海恒远ELISA试剂盒供应商，感谢朋友们对我公司的支持！