您听说过酶切技术吗？每一种实验方法技术都是有它的实验原理与目的的。那么酶切技术呢？问题既然是我们提出的，那么就由我们来为您解答。
    酶切可以获得粘性末端进行连接，它用于验证DNA重组是否成功，还用于验证质粒酶切位点是否有效。我们下面就来看看那些个步骤详解，恒远实验“单双”酶切。
实验之前上海恒远为您整理出了所需要用到的材料试剂：

    我们把实验的材料准备好了之后就可以进入实验的操作过程了，本文的标题中，“单双”酶切您怎么理解？我们来依次看看。
首先来看单酶切： 
1、我们在在1.5 mL灭菌离心管中依次加入质粒DNA：X μL（约1 μg）、限制性内切酶：1 μL（约10 U）、10×buffer：2 μL、ddH2O：补足20 μL。
2、混匀，做好标记。
3、37℃水浴1-3 h。
4、70℃水浴10 min中止反应。
5、电泳检测酶切效果。
双酶切：
1.  在1.5 mL灭菌离心管中依次加入质粒DNA：X μL（约1 μg）、限制性内切酶1：1 μL（约10 U）、限制性内切酶2：1 μL（约10 U）、10×buffer：1或2 μL、ddH2O：补足20 μL。
2、混匀，做好标记。
3、37℃水浴1-3 h。
4、70℃水浴10 min中止反应。
5、电泳检测酶切效果。
    实验结束之后要怎么去分析其结果呢？我们假若一种酶在环状质粒DNA中只有一个酶切位点， 且酶切*，紫外灯下检测电泳结果，则单酶切应为一条带， 而双酶切则为两条带。如果条带数目多于理论值，那么有可能是酶切不*。如果酶切结果与酶切前的质粒条带一样，比如说超螺旋、线性和开环三条带，则说明质粒*没有被切开。
    您在操作实验的过程中也要注意，您酶切的选择原则一般是尽量扩大酶切体系，这样抑制因素得以稀释；基因组DNA或质粒DNA酶的用量较一般DNA大，一般为1μg/10U；所加酶的体积不能超过酶切总体积的1/10，否则甘油浓度会超过5%，会产生星号活力；对难切的质粒或基因组DNA应延长反应时间4―5hr， 甚至过了一个晚上。灭活限制性内切酶活性可以采用加热灭活，乙醇沉淀，酚/氯仿抽提，添加EDTA或SDS等方法，具体每一种酶可能有些方法不能*灭活，这一点需要您多要注意。
    今天的文章到这里就结束了，实验中的材料、步骤以及zui后需要注意的事项我们都为您总结出来了，如果您还有其它实验、产品、技术方面的问题都可以我公司的，上海恒远非常感谢您的支持！