新的实验项目已经开始执行策划了，可能会有些实验新手面对ELISA的时候有些不知所措，在这之前掌握一些相关资料是肯定需要的，我公司在前面的文章里面也介绍过不少，今天上海恒远技术为您整理出了的试剂盒资料研究结果，一起来看下吧：
 1. 在成批手工检测中，还应注意操作时差的影响。加样及混匀时间的差异，使抗原抗体反应和酶促反应时间不一致，对竞争法及定量检测影响很大，不注意可能会导致错误结果或定量不准。
 2. 加样一般使用加液器，在ELISA中一般有4次加样：加标本、加酶结合物、加底物和加终止液。加标本时必须每份标本使用一支移液器吸嘴，以免交叉污染。加酶结合物、底物和终止液时则不需更换吸嘴。
 3. 洗涤是ELISA操作过程中决定实验成败的一个关键步骤。目的是除去未结合的免疫反应物，终止抗原抗体反应，除去标本中与反应无关的成分、游离的酶标物以及反应过程中吸附于固相载体上的非特异性物质。上海恒远建议可用洗板机洗板或手工洗板，前者洗涤质量较好，各反应孔洗涤效果均一，批内、批间差异小，手工洗板应注意控制各孔洗涤效果，差异不宜太大。
 4. 准确判定结果须使用ELISA测读仪（酶标仪），比色法判读可选择单波长或双波长，根据反应液颜色的不同选用不同波长的滤光片，以空白孔校零测定反应孔的吸光度值（A值）。酶标仪具有良好的重复性。
    我公司试剂盒提供免费检测服务：使用上海恒远生物试剂盒，只收取试剂盒的费用，其他辅助试剂全部免费。我们将根据实验工作量和难易程度，双方协定实验周期，保质保量完成委托实验，并将实验结果和材料用特快专递免费寄送到您手中。
    
   本次的试剂盒资料中还包括了问题解决这一方面，我们首先来看下“边缘效应”这一问题。其实也就是外周孔显色较 中心孔深。经研究证实在温育中的热力学梯度可能是根本原因之所。聚苯乙烯本身为不良热导体，在实验室的常规ELISA测定中，将板从室温（通常在25℃左右）置于37℃温箱，板也升温时，在外周孔与中心孔之间可能存在一热力学梯度。因此使用水浴或在将反应溶液加入至板孔中时，将板和溶液均加热至温育温度（如37℃），就可以很容易地排除“边缘效应”了，并且可提高测定的重复性哦！ 
◇ 在ELISA实验中，血清为什么要稀释？ 
   1. 竞争抑制比较明显，应稀释竞争物；
   2. 血清中含有的性腺激素比较低，应该浓缩才对。
    血清稀释用普通的PBS即可，可加1％的BSA，能有效降低ELISA本底，当然如果你嫌麻烦我觉得用生理盐水替代PBS关系也不大。不管你是用直接竞争还是间接竞争，血清的稀释倍数肯定要事先确定，但也不用一点点，你做一个预试验即可，选择OD在1.0左右的稀释倍数，即你的竞争ELISA中阴性孔OD在1.0，这样作出来的曲线比较敏感。
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     ELISA试剂盒预期应用：ELISA法定量测定血清、血浆、组织匀浆或其它相关生物液体中目标蛋白含量。ELISA法由于本身所具备的*性，是一项很有发展前途的血清学诊断方法，应用领域也越来越广泛。可我们认为ELISA不是万应良方。因为ELISA法还是有局限性，ELISA中变异因素多，对于要诊断某一疾病时，必须进行一系列实验室预试，摸索，或实验研究，常用竞争法测定血清的溶度。
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