ELISA 实验标准曲线的绘制选择什么方程去拟合?做校准曲线时,曲线拟合类型是选择线性还是二次方程(曲线)。二者哪一个更?这两个问题几乎是刚开始接触所有做ELISA试剂盒实验的新手必问的问题。因为标准曲线做的好与坏会直接影响到实验的结果,甚至是关系到实验的成败。恒远技术为您总结以下要点:
1.在S曲线的低浓度部分可以用乘幂方程很好的拟合,中低浓度部门可以用直线方程,中间部门可用对数方程,而中后段可用四参数。免疫检测时尺度点(可以是倍比稀释的,也可以不是)浓度假如和相应的吸光度(OD)值假如能够呈现直线关系当然是的了,从而推算出样品的浓度值。
2、标准曲线方程一般都是:Y=KX+B,K为正值。
3.做标准曲线,在不确定样品中含量时,建议做个预分析,配个确定浓度的标准溶液,定下样品中的含量,然后在这个含量的80%-120%或者更大的范围做线性,一般要求相关系数大于0.99以上就说明线性可用。