本月初时，南京中医药大学的张老师第二次购买了我司进口人Elisa试剂盒产品，上次实验在上海恒远生物公司技术员的指导下顺利完成，张老师对我司产品与服务都非常满意。而本次实验中，张老师遇到了一些问题，到何咨询。

    张老师说：“我在网上看到一些帖子说是通过抗原浓度，抗体的稀释倍数，设立梯度来确定效果，可是我想问测的的结果怎么看哪个效果好呢？看了一篇文献他是说OD450值为1左右条件作为*条件，很是不解啊，我做的双抗夹心法。" 

    听完张老师的问题描述后，何立即将问题转至技术部。二十分钟后，技术员将问题解析方案整理出：这个确实有好几种因素来确定，双抗夹心的话，有包被抗体的浓度、缓冲液的选择、孵育时间等好几种因素，您要测试*的效果，就要控制变量的方法来确定。

    一般来说，如果您是夹心法的话主要要用棋盘法确定一抗和抗原的浓度，二抗一般不需要怎么摸条件，您选一到两个说明书上推荐的浓度即可。棋盘法中选OD值在1左右的一抗浓度，(此时，应该有多个1对应的浓度)您要选一个在这个浓度下，测抗原的线性拉得zui宽的那一个。如果一抗浓度太高，想要测的抗原基本都可被吸附，这样就达不到灵敏检测的目的；如果一抗浓度太低，OD值比1小太多又会增大误差。另外，抗体稀释液一般就是在洗涤液中加入一定浓度的不相关蛋白。这样可以减小非特异吸附(吐温和蛋白均有此作用)，直接用PBS的话可能会造成阴性OD过高

    问题解决后，张老师非常满意，并表示下学期有新的实验课题要做，还会继续来买。非常感谢南京中医药大学张老师对上海恒远生物公司的鼎力支持与认可！我们会竭诚为每一位客户提供的产品与服务。