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详情介绍
一、产品参数规格
【产品名称】:人白介素8(IL-8 )ELISA试剂盒
【检测方法】:酶联免疫法/酶免法(ELISA)
【产品性状】:96T/48T,盒装液体
【贮 藏】:2-8°C
【有 效 期】:Elisa试剂盒二年,我公司Elisa试剂盒均为批次,可放心购买。
【主要成分】:酶标板,试剂,标准品等。
【标 本】:血清/血浆/细胞培养上清液/组织匀浆/组织液/尿液/分泌物
【质量承诺】:我们坚持对产品质量作不断的评估、创新和改善以确保您对我们产品的高度信任。
【待检样本】:体液、血清、血浆、细胞培养上清液、尿液、组织匀浆、心房水标本等
【样品采集】:Elisa试剂盒收集标本前必须清楚要检测的成份是否足够稳定。对收集后当天进行检测的标本,储存在4℃备用,如有特殊原因需要周期收集标本,将标本及时分装后放在-20℃或-70℃条件下保存。避免反复冻融。标本2-8℃可保存48小时,-20℃可保存1个月。-70℃可保存6个月。部分激素类标本需添加抑肽酶。
【保 质 期】:半年(六个月)
二、实验原理:
Elisa试剂盒原理
ELISA是以免疫学反应为基础,将抗原、牽9体的特异性反应与酶对底物的高效催化作用相结合起来的一种敏感性很高的试验技术。由于抗原、抗体的反应在一种固相载体──聚苯乙烯微量滴定板的孔中进行,每加入一种试剂孵育后,可通过洗涤除去多余的游离反应物,从而保证试验结果的特异性与稳定性。在实际应用中,通过不同的设计,具体的方法步骤可有多种。即:用于检测抗体的间接法(图a)、用于检测抗原的双抗体夹心法(图b)以及用于检测小分子抗原或半抗原的抗原竞争法等等。比较常用的是ELISA双抗体夹心法及ELISA间接法。
三、ELISA试剂盒优点:
我司共有14000余种ELISA试剂盒物种涵盖Human,Mouse,Rat等,品种具备以下优点:
*品质—高品质的抗体和试剂是ELISA试剂盒的基础
精确特异—特异检测目标分子,结果精确可重复
高度灵敏—可检测到pg/mL级别的目标
种类齐全—可覆盖人、大鼠、小鼠、棉鼠、猕猴、猪、马、犬和猫等多个种属
优化设计—可拆卸式96孔板(12X8),为血清、血浆、尿样和细胞培养物样本检测进行优化
四、人白介素8(IL-8 )ELISA试剂盒操作过程中可能出现的问题和解决方法
ELISA试剂盒操作过程中可能出现的问题和解决方法 | ||
问题 | 可能原因 | 解决方法 |
显色淡,灵敏度偏低 | 1、试剂盒在运输途中时间太长,温度太高 | 尽量缩短运输时间,夏季应放冰块降温 |
2、试剂盒未充分平衡 | 试剂盒从2~8℃冰箱取出后打开盒盖,于室温平衡至少20分钟,确保所有试剂已平衡至室温(约25℃)。 | |
3、培养箱温度不足37℃ | 注意培养箱温度,放入反应板后尽量减少开启次数以免影响温度恒定,非隔水式培养箱尤其应注意 | |
4、保温时间不足 | 校正定时钟准确定时 | |
5、洗涤时冲击力太大、浸泡时间过长、洗涤次数增加 | 按说明书要求保留洗涤时间,准确记住洗涤次数 | |
6、移液器吸液量不足,吸嘴内壁挂水太多或内壁不清洁 | 校正移液器,吸嘴要配套,装吸嘴时要紧密,吸嘴内壁要清洁,一次性使用 | |
7、蒸馏水水质有问题 | 使用新鲜合格的蒸馏水 | |
8、底物作用时间不足 | 准确定时 | |
ELISA试剂盒背景深,全部呈有色 | 1、洗涤不充分,洗后未拍干,样品中其它成分残留或酶标记物残留 | 浓缩洗液准确配制;10倍浓缩洗涤液如有结晶则应让结晶于室温全部溶解后再量取稀释;充分洗涤,*拍干。加样或加酶拍板的滤纸应弃去不用,不要反复使用,否则易造成污染 |
2、样品污染 | 样品应新鲜采集,或低温保存,防止污染 | |
3、培养箱温度超过37℃或反应时间过长 | 调整培养箱温度,准确定时 | |
4、吸嘴重复使用,未洗净或消毒不* | 吸嘴尽可能一次性使用 | |
5、蒸馏水被污染 | 使用新鲜蒸馏水 | |
6、酶等试剂混用 | 不同批号试剂勿混用 | |
7、一次实验的标本量过多,加样时间太长,导致实际反应时间延长 | 合理安排实验,避免几块酶标板同时加样 | |
ELISA试剂盒重复性不佳 | 1、样品数量多少不一,加样时间有长有短 | 重复某一样品时,加样时间尽可能与*次接近 |
2、保温时间不*,洗涤条件不*,操作人员不* | 重复测定标本,操作条件、人员等应尽可能与上次保持*,以排除这些因素造成的不*的可能性 | |
3、加样量不* | 样品稀释前应充分混匀,尽可能使用同一移液器并装紧吸嘴 | |
出现白板,阳性对照不显色 | 显色液变质 | 更换新的显色液 |
洗涤液配制有误 | 请按说明书所示稀释倍数配制 | |
未加酶结合物而认为已加入 | 注意不要漏加 | |
终止液误作洗涤液稀释或当底物液使用 | 每次加液前均应看清标签 |
五、常见问题解答
小编简单整理了5个问题,具体内容如下:
1、一个ELISA试剂盒检测几个样品?
小编自己在各大论坛看到zui多的三个答案:
1)48T 可做42个样本加6个标准曲线;96T 可做90个样本加6个标准曲线
2)以96T试剂盒来算,定量的试剂盒一般可以做90个左右的样品,定性的试剂盒可以做94个左右的样品
3)96T的ELISA试剂盒,去除标准品复孔检测,zui多还能检测80个标本;48T的zui多30个样本。
2、elisa试剂盒96T的能做检测多少血清样品?板能重复利用吗?
96T,一般做复孔的话,做标准曲线需要16个孔,剩下80个孔就可以做40个样本。这个板不能重复利用。而且配套的试剂也只是够一块板子用的。
3、想请教一下,我想用elisa法测血清里的一种抗原,查了资料,发现没有现成的试剂盒用,现在就有2种备选方案,一种是买抗体对自己包被(查了R&D等大公司都没有可用于elisa的单抗)。哪种比较好呢?自己包被的会不会比国产的试剂盒可靠呢?
如果你觉得技术不错有队其他公司不放心,可以自己购买抗体对自己包被,这个就是麻烦点,自己包被用着放心,舒心;
另外国内还是有一些资质不错的公司,如上海恒远,上海恒远,上海沪鼎等等
4、western 和ELISA 处理样本有何差别?
Western Blot 样品制备要加蛋白裂解液(含有蛋白酶抑制剂),然后冰上研磨,收集于EP管,冰上裂解30min,4度12000rpm离心15min,取上清分装,即得到蛋白样品。建议直接电泳,多余的-80保存。建议分装的蛋白每支略多于一次上样量,一次性用完一支,避免反复冻融。
ELISA样品,直接脑组织冰上匀浆,收集于EP管,同上一样离心,大约220-250ul每支分装(因为ELISA上样量基本都是每孔100ul,做复孔,每个样品2孔,就需要200ul,为了避免不够2孔,分装时要大于200ul每支),直接实验。多余的-80保存,一样避免反复冻融。
不过ELISA少量样品进行预实验,或者查阅文献,看看大概组织里有多高浓度,选择合适的试剂盒,测量范围要与组织浓度相符。避免浓度过高测量不准,或者浓度过低,小于试剂盒zui低可测浓度。
5、Elisa试剂盒该买哪家公司的呢?
提出这个问题的朋友其实该打,目前上各个品牌的试剂盒生厂商,都会有其偏重点,像R&D在细胞因子方面的试剂盒就非常牛逼,而其他牌子也一样的。
Bender:粘附分子方面的试剂盒;
Cayman:花生四烯酸类产品的试剂盒;
Merck(Linco):内分泌研究方面的试剂盒;
六、“ELISA试剂盒"咨询和订购的方法
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