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(技术篇)使用快速简便的ELISA试剂盒需注意哪些?
更新时间:2017-01-16      阅读:1088

   上海恒远ELISA试剂盒拥有快速、简便、准确、灵敏度高等几大特点。ELISA实验条件主要由实验室的操作环境和操作人员的操作熟练程度两方面组成,但试剂盒对实验室操作环境的要求是几种药物残留检测方法中相对较低的。由于大部分的试验操作步骤都是由实验人员来完成的,人为的误差相对严重一些。今天上海恒远小编就来分享(技术篇)使用快速简便的ELISA试剂盒需注意哪些问题及解决办法:


问:加入稀释剂是否会将样本进一步稀释?
答:因为稀释剂是加入到所有的孔中,标准和被测样本都被同样稀释,所以样本的浓度可从标准曲线读出,而不需作稀释调整。


问:为什么不将测试范围延伸到所述的灵敏度?
答:灵敏度是统计中大于零的可测到的zui低值。它是通过本底信号和试验的可变性计算出来的。灵敏度是将20个零复制物的中值加两个标准差从标准曲线换算成分析物的浓度。而zui低标准是我们可以放心的、仍可与标准曲线成直线相关的zui低点,因而是可定量的。


问:标准曲线为什么要采用4-pl拟合?
答:R&D在研发和质控我们绝大多数的quantikine ELISA试剂盒时,采用4-相参数的曲线拟合。一般来说,它比log-log和直线有更好的曲线拟合。如果数据分析不可用4-pl的话,log-log是下一个的选择。

         
问:试验步骤中说要用500rpm,我的摇床达不到。这个速度是正确的吗?
答:500rpm使用的是0.12英寸的震荡轨道。如果你的震荡器用更大的震荡轨道,500rpm的确是过快了。在这种情况下,你应根据R&D Systems的建议重新调整震荡速度。你可拿一个多余的96孔微孔板,加入洗液,洗液的量与实验时孔中的溶液量一致;封板后,调整震荡器的速度,直到液体在孔的上部剧烈旋转但不溅到封膜上或产生泡沫为止。


问:quantikine ELISA试剂为什么需要做稀释?
答:① 在绝大多数的样本中细胞因子的含量非常高,如不经稀释,读数将高于标准曲线;②也是zui普遍的原因我们建议做稀释,是将样本中的干扰或基质效应稀释掉。


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