丙酮酸钠可以作为细胞培养中的替代碳源,尽管细胞更倾向于以葡萄糖作为碳源,但是,如果没有葡萄糖的话,细胞也可以代谢丙酮酸钠。丙酮酸钠的贮存液浓度一般为50mM,-20℃保存,培养基中的终浓度为1mM.
丙酮酸钠是zui常见的丙酮酸盐,是一类内源性小分子物质,丙酮酸钠和丙酮酸均是天然存在于人体内,并参与全身各组织和器官的代谢。丙酮酸钠在医学上、诊断试剂以及医疗器械中被广泛用作缓冲剂、赋形剂和抗氧化剂。此外丙酮酸钠在细胞培养中也是常用到的试剂之一,那么丙酮酸钠在细胞培养中的作用是什么呢?
酮酸钠在细胞培养中的作用:丙酮酸钠在人体日常生活中,是惹你进行代谢生命活动所必须的,它是一种能量物质,在科学研究进行的细胞培养试验中,科学研究工作人员还发现了有作用类似的物质,类似参与身体代谢活动的为人体提供行动的能量的物质还有葡萄糖,乳酸钠等,在人体中大多数细胞只利用葡萄糖就够了,在细胞培养中丙酮酸钠是必须的物质。丙酮酸钠在培养基中起到替代碳源的作用,参与细胞营养代谢。
丙酮酸钠制备:
将领取的丙酮酸在车间内放置一小时以上,将抽料管用干净的聚酯纤维布包住管口,缓缓插入桶底部,用真空将丙酮酸 280kg抽入丙酮酸钠反应罐内,抽毕,开搅拌,开搅拌,将预处理好的38~42℃碳酸钠溶液缓缓压至反应罐内(控制压力在0.03~0.06MPa),控制反应罐内温度不超过35℃(若反应过程中,温度超过35℃,应采取降温措施),反应过程中应进行pH值检测,当反应液pH值达到4.8~5.3(用精密试纸测定)时停止加料,控制加料时间约1小时,反应完毕,将1440kg 95%乙醇缓缓抽入(管口应用干净的聚酯纤维布包住)反应罐内(加入时速度应先慢后快,开始50%的量加入时间应控制在60分钟内,后50%的量加入时间控制在30分钟内),抽毕,离心甩干,放入不锈钢桶内送入烘房,倒入双锥真空干燥箱内,控制真空度≥-0.09Mpa,热水温度为75~80℃,真空干燥器内温上升为65℃时,记录起烘时间,控制真空干燥器内温度为65~70℃,保温2小时,自起烘2小时后,请验,干失≤0.5%,冷却约20分钟,出料,用20目过筛,包装,入库。收率应在105±5%之间。
Hank's 平衡盐溶液(HBS)要在空气中使用,不需要CO2培养箱。原因是什么?Hank's 平衡盐溶液(HBS)和Earle's平衡盐溶液(EBS)有什么本质的功能差别?
HBS和 EBS 的主要差别在于碳酸氢钠的水平,在Eagles (2.2g/L)中比在Hanks (0.35g/L) 中高。碳酸氢钠需用高水平的CO2平衡,以维持溶液的PH值。Eagles液在空气水平的CO2 中,溶液会变碱,Hanks液在CO2培养箱中会变酸。如果希望在CO2培养箱中保存组织,需要用Eagles液,。如果仅仅是清洗将要在细胞培养基中储存的组织,用Hanks液就可以了。