ELISA检测试剂盒吸附性能好，空白值低，孔底透明度高的固相载体，适用血清、血浆、组织匀浆液、细胞培养上清液、尿液等等多种标本类型。“花板”问题是ELISA检测试剂盒比较常见的一个问题，那么客户在遇到这类问题时，该如何处理呢?

在ELISA检测试剂盒结果"花板"的这一问题中，对检测数据造成很大影响，往往会使检测者做出误判，是实验中必须要注意和避免的。针对这个问题，我们建议从以下几点出发：

一、标本/试剂/仪器

1.标本：出入境人员的血液标本。

2.试剂：HBsAg、HCV、HIV、梅毒试剂均为不同厂家的ELISA检测试剂盒。

3.仪器：脑心机，洗板机，酶标仪。

二、方法。所有被检出入境人员的血液标本，按照各个厂家提供的ELISA检测试剂盒说明书进行HBsAg-HCV-HIV梅毒等检验项目操作。所有试剂均在有效期内使用。

三、结果。所使用不同厂家的试剂有时会出现“花板”问题。

四、分析

在所有标本进行检测的过程中，所用的仪器及加样过程都处于正常状态的情况下，步骤均按照各种试剂说明书的要求去做，排除实验所用仪器和操作步骤对实验结果的影响外，ELISA检测试剂盒内的空白、阴性和阳性对照以及室内质控值都很正常，只有检测的血液标本情况异常。根据国家和疾控中心报告阳性率的比例不应该是很高的情况下，HBsAg在用Elisa之前都经过了快速金标试剂的检测，阳性标本得到了一定的控制。因此，原因可能是在标本的处理，特别是放置时间、离心速度和离心时间方面的问题。所以，标本的处理就成为实验结果的主要可疑因素。

为了避免“花板”现象的出现，降低检测的假阳性率，获取准确的实验结果，小编建议应选择灵敏度高、特异性好、稳定性好、批间差小、操作方便省时的ELISA检测试剂盒。

另外，小编再介绍下ELISA检测试剂盒血清标本的保存建议：

1.样本的采集及血清分离中要注意尽量避免细菌污染，一则细菌的生长，其所分泌的一些酶可能会对抗原抗体等蛋白产生分解作用;二则一些细菌的内源性酶如大肠杆菌的β-半乳糖苷酶本身会对用相应酶作标记的测定方法产生非特异性干扰。

2.血清标本如是以无菌操作分离，则可以在2～8℃下保存一周，ELISA如为有菌操作，则建议冰冻保存。样本的长时间保存，应在-70℃以下。

3.冰冻保存的血清标本须注意避免因停电等造成的反复冻融。标本的反复冻融所产生的机械剪切力将对标本中的蛋白等分子产生破坏作用，从而引起假阴性结果。此外，冻融标本的混匀亦应注意，不要进行剧烈振荡，反复颠倒混匀即可。

4.标本在保存中如出现细菌污染所致的混浊或絮状物时，应离心沉淀后取上清检测。

5.要注意避免出现严重溶血。血红蛋白中含有血红素基团，其有类似过氧化物的活性，因此，在以HRP为标记酶的测定中，如血清标本中血红蛋白浓度较高，则其就很容易在温育过程中吸附于固相，从而与后面加入的HRP底物反应显色。