建立促乳素单克隆抗体制备中筛选阳性分泌细胞的间接ELISA检测方法

【方法】用促乳素纯品与Freund佐剂免疫6~8周龄雌性BALB/c 小鼠,初次免疫采用抗原与*Freund佐剂,每2周免疫1次,从第2次开始采用抗原与不*Freund佐剂,免疫4次后尾静脉采血,收集血清制备阳 性对照抗体,以未免疫的BALB/c小鼠血清为阴性对照,筛选间接ELISA法检测促乳素抗体的*反应条件,并对单克隆抗体制备中的阳性细胞进行筛选。

【结果】间接ELISA法的*反应条件:血清稀释倍数为1∶200,抗原包被质量浓度为100 ng/mL,封闭液为1%牛血清白蛋白,酶标抗体的工作浓度为1∶10 000,酶标抗体作用时间为37℃90 min,底物作用时间37℃30min。用该方法检测融合的杂交瘤细胞,zui终获得OD450为0.875和0.460的阳性细胞株。

【结论】建立了检测促乳素抗体的间接ELISA检测方法,该方法方便易行。